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　　微流控技術(shù)是一種通過微小的通道和微型裝置對流體進(jìn)行精確操控和分析的技術(shù)。它是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展過程中的一種重要的生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和重要性。它在高通量分析、個性化醫(yī)療、細(xì)胞篩選等方面有著巨大的潛力，Aigtek安泰電子今天就將為大家分享一篇微流控領(lǐng)域研究成果，一起接著往下看吧~

　　細(xì)胞的力學(xué)表型是細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化的重要指標(biāo)，它與細(xì)胞狀態(tài)和細(xì)胞功能密切相關(guān)。力學(xué)特性的改變能反映包括細(xì)胞周期進(jìn)展、惡性腫瘤、白細(xì)胞活化和干細(xì)胞分化等細(xì)胞活動過程。同時，細(xì)胞力學(xué)的測量能擺脫對外部標(biāo)簽（例如熒光染料）的依賴。因此，它構(gòu)成了細(xì)胞鑒定的一個重要的非侵入性生物標(biāo)志量。此外，由于細(xì)胞力學(xué)表型決定了細(xì)胞對其周遭環(huán)境力的反應(yīng)的大小，細(xì)胞力學(xué)還可以為細(xì)胞生命活動過程的觀測提供一個新穎的生物物理視角。傳統(tǒng)的細(xì)胞力學(xué)檢測利用原子力顯微鏡、微吸管抽吸、光學(xué)拉伸和平行板流變學(xué)等方法，來量化暴露于外部應(yīng)力下的單個細(xì)胞的變形。這些方法可以評估力在時間軸上的響應(yīng)狀況，并能夠提取細(xì)胞的物理特性，如彈性模量或粘度。然而，這些方法受到技術(shù)要求高，流程耗時長的限制，很難在專業(yè)實驗室以外的地方實現(xiàn)高通量的測量。在這種情況下，基于微流空的方法則是一個很有吸引力的選擇。微流控系統(tǒng)可以通過監(jiān)測細(xì)胞在外力作用下的形變能力進(jìn)行可靠的、高通量的評估，并能夠?qū)鶆蚝彤愘|(zhì)細(xì)胞群體進(jìn)行徹底的表征。

　　近期，來自TechnischeUniversit?tDresden的JochenGuck、UniversityofCalifornia的DinoDiCarlo和MassachusettsInstituteofTechnology的ScottR.Manali在Naturemethods上發(fā)表了題為“Acomparisonofmicrofluidicmethodsforhigh-throughputcelldeformabilitymeasurements”的文章，該文章提出了一項標(biāo)準(zhǔn)化的交叉實驗室研究，比較了三種基于微流體的測量細(xì)胞力學(xué)表型的方法:收縮型變形能力細(xì)胞儀(cDC)、剪切流變形能力細(xì)胞儀(sDC)和拉伸流變形能力細(xì)胞儀(xDC)（圖1）。這三種方法都能檢測暴露于改變的滲透壓下引起的細(xì)胞形變，并可用來確定導(dǎo)致形變能力變化的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，然而這些方法間卻從未有過橫向的比較。本文于是進(jìn)行了一項標(biāo)準(zhǔn)化的交叉實驗室研究，比較了三種形變性細(xì)胞術(shù)各自最有代表性的實驗方法，從而進(jìn)一步加深了人們對不同變形能力細(xì)胞測定方法適用性的理解，并為解釋使用不同平臺進(jìn)行的變形能力測量提供了背景。

　　圖1測定細(xì)胞變形能力的基于微流體的方法的比較

　　該團(tuán)隊分別使用cDC，sDC和xDC三種方法，評估了來自相同來源和傳代數(shù)的人源早幼粒細(xì)胞白血病(HL60)細(xì)胞在發(fā)生滲透變化和LatrunculinB誘導(dǎo)的肌動蛋白解體的狀態(tài)下的形變程度。

　　首先，他們將HL60細(xì)胞在（高于血漿滲透壓300mOsm的）400-700mOsm的溶液中脫水十分鐘（圖2a）。然后，將這些經(jīng)過不同濃度的高滲溶液處理過的細(xì)胞分別通過cDC,sDC和xDC，并觀察其形變程度。將數(shù)據(jù)經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化處理后，能看到相對形變（RD,relativedeformation）在不同的力學(xué)表型儀器上所表現(xiàn)出來的隨高滲溶液滲透程度的變化趨勢是一致的（圖2e）。理論上，當(dāng)細(xì)胞處于高滲溶液中時，細(xì)胞內(nèi)的水分會向外排出，使得細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的排布更加緊密，從而增強(qiáng)細(xì)胞的強(qiáng)度。由此，可以得出結(jié)論，即細(xì)胞內(nèi)膠體組分的堆積密度誘導(dǎo)的形變是可以在所有測試方法中檢測到的。

　　圖2滲透壓變化對細(xì)胞變形能力的影響

　　然而關(guān)于監(jiān)測LatrunculilnB(LatB)誘導(dǎo)的肌動蛋白解體的情況，不同的設(shè)備則會得出不同的結(jié)論。LatB能清除肌動蛋白單體，從而引起肌動蛋白細(xì)胞骨架的解體（圖3a）。首先，HL60細(xì)胞也被不同濃度的LatB溶液預(yù)處理，然后再分別通入cDC,sDC和xDC儀器中，并觀察其形狀變化。經(jīng)分析數(shù)據(jù)可知發(fā)現(xiàn)，cDC和sDC對于細(xì)胞形變程度的變化較為接近，而xDC則對于細(xì)胞由LatB誘導(dǎo)所致的肌動蛋白解體情況不能進(jìn)行很好的監(jiān)測(圖3e)。該團(tuán)隊經(jīng)分析比較推測其主要原因是不同設(shè)備中所產(chǎn)生的應(yīng)變率會有所區(qū)別。cDC與sDC能產(chǎn)生相近的應(yīng)變率，而xDC則應(yīng)用了更高的應(yīng)變率，而在高應(yīng)變大小和應(yīng)變率下，能觀察到的肌動蛋白網(wǎng)絡(luò)的流態(tài)化。

　　圖3latb誘導(dǎo)的肌動蛋白解體對細(xì)胞變形能力的影響

　　除了測量細(xì)胞的形變程度以外，上面提出的三種檢測方式，每一種都具有能拓寬基礎(chǔ)測量維度的一些不同的功能。如cDC,就能提供更多的參數(shù)，例如進(jìn)入和過境速度，來描述細(xì)胞通過狹窄流道的過程，并能夠敏感地讀出細(xì)胞的浮力質(zhì)量。sDC的突出特點是數(shù)據(jù)處理的實時性，這使得該方法能夠兼容形變分析下游的主動排序。此外，對于sDC來說，它擁有集成類細(xì)胞分選儀(FACS)的潛力，并具有從形變數(shù)據(jù)中提取楊氏模的理論框架。與此同時，xDC則能實現(xiàn)更高的通量。所有這三個系統(tǒng)，還都能與明場細(xì)胞成像技術(shù)進(jìn)行整合，以獲取更多的基于圖像的細(xì)胞表征數(shù)據(jù)。

　　將力學(xué)特性與當(dāng)前的細(xì)胞行為觀點相結(jié)合，將為更全面地理解生理和病理過程鋪平道路，并具有及重要的潛在的臨床診斷價值。

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